31.比表面积的具体值及作用：

每克填料的表面积与粒度、含孔率有关􀂄 比表面积大，会增加样品与键合相之间的反应，增加保留、分离度和制备时的上样量比表面积小可以缩短分析时间和梯度时的平衡时间􀂄 并不是比表面积大或者小就更好，选择适合目的的比表面积

2022-07-27

32.碳含量的具体值及作用：

硅胶表面键合相的比例与比表面积，键合覆盖度等有关 对ODS，碳含量从7-18%，或者更多， ODS的碳含量高，则保留增加，适合分析非极性化合物。制备色谱的上样量也可以增加 碳含量通常影响选择性。

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33.硅胶表面纯度（金属含量）及作用：

高纯硅胶表面的重金属含量，一般为ppm级，液相系统的金属部件也会产生重金属 待测组分与重金属发生螯合反应会导致色谱峰形不佳，产生前伸或拖尾􀂄 能与金属形成5或6元环螯合物的待测组分特别容易受重金属影响􀂄

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34.硅胶表面硅醇基及作用：

硅醇基的酸性较大,可与碱性化合物牢固的结合, 因此含有较多残留硅醇基的填料在分离碱性化合物时容易产生脱尾、变宽、保留延长等现象 加入适当的扫尾剂如三乙胺可以掩蔽残留的硅醇基, 使碱性化合物峰形变好

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35.键合相种类及作用:

超过80%的样品可以使用反相色谱分离，一般方法开发也首先使用反相色谱 C18，C8，C4等反相色谱，从C18到C8，C4，对化合物的保留降低􀂄 NH2，CN等可用于正相，也可以用于反相􀂄 键合试剂不同，对化合物的选择性不同方法开发时, 长链的烷基键合相(C18,C8)比短链的(C4,C3)稳定；非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定

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36.封端的意义及作用

目的：减小残留硅醇基 未封端的Si-OH 基团是碱性化合物拖尾的主要原因􀂄 酸性条件下，氢离子通过未封端的Si-OH 的间隙进攻-O-Si键，导致填料水解􀂄 封端的基团会影响色谱柱的使用pH值、对化合物的选择性等

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37.高封端的ODS色谱柱的优点

pH使用范围宽 极性基团封端的色谱柱可以在高水相流动相条件下使用，适合分离极性化合物 残留的硅醇基影响最小，碱性化合物不拖尾 改善选择性 一般优先使用高封端的色谱柱

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38.低封端或不封端的ODS色谱柱的优点

因为硅醇基的影响，对极性相同的化合物有特殊选择性

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39.需要了解客户样品性质有哪些？

样品结构 溶解性（有机溶剂、水） pH值 极性 酸碱性 分子量

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40.需要了解分离的目的有哪些？

分析? 制备? 快速分析? 含量分析? 杂质检验? 所有组分分离等

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