46.液相色谱法有几种类型?它们的保留机理是什么?在这些类型的应用中,最适宜分离的物质是什么?

2022-07-27 6

液相色谱法有以下几种类型:吸附色谱法;分配色谱法;离子交换色谱法;离子色谱法;离子对色谱法、排阻色谱法等。 吸附色谱是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的。最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样,凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。 分配色谱的保留机理是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。可以分 离各种无机、有机化合物。化学键合色谱是分配色谱法的特殊情况;固定相主要由担体和特定的有机官能团所构成,由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体,所以同时遵循吸附和分配的机理。其中反相色谱常用于分离极性较弱的化合物,如化合物,如蛋白质、肽、氨基蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱、、农药、兽药等含有非极性基团的各种物农药、兽药等含有非极性基团的各种物质。 离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术来测定溶液中阳离子和法是利用离子交换原理和液相色谱技术来测定溶液中阳离子和阴离子阴离子的的一种分析方法。一种分析方法。主要是用来分离离子或可离解的化合物。应用于无机离子的主要是用来分离离子或可离解的化合物。应用于无机离子的分离分离,,也可以也可以用于用于有机和生物物质,如氨基酸、有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。核酸、蛋白质等的分离。 离子色谱色谱法是由是由离子离子交换色谱派生出的一种交换色谱派生出的一种分离分离方法方法,,主要是为了消除流动相中强电主要是为了消除流动相中强电解质背景离子对解质背景离子对电导检测电导检测器的干扰。器的干扰。与与离子交换色谱类似离子交换色谱类似,离子色谱法,离子色谱法可以用来分离离子可以用来分离离子或可离解的化合物。可应用于无机离子的或可离解的化合物。可应用于无机离子的分离分离,,也可以用于也可以用于有机和生物物质,如氨基酸、有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。核酸、蛋白质等的分离。 在离子对色谱色谱中,样品组分进入色谱柱后,组分的离子与对离子相互作用生成中性化合物,从而被固定相分配或吸附进而实现分离的。各种有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分离是离子对色谱的特点。 排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系,而分离、分析的方法。主要被用于分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、核酸等;近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。